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关于程序降温盒的使用经验分享

点击次数:1410 发布时间:2016-09-27
  
  
  程序降温盒是细胞冻存盒类产品的经典实验耗材之一。该程序降温盒或称细胞冻存盒为成功冷冻保存细胞提供和良好重复性的冷却率:-1℃/分的冷冻率。
  
  程序降温盒的使用注意事项如下:
  
  经验1:冻存盒外表面有刻度的吧,异丙醇液面要高于底线。4a.C*D8Y&P9A,y
  
  冻存盒肯定是先放在室温,然后放进去细胞,置于-80,利用异丙醇实现梯度降温啊。)
  
  根据论坛里的讨论,异丙醇使用过一段时间后是要更换的,但是我一直没换过,也没发现很大问题。
  
  经验2:我们实验室冻存盒平时放4度,需要冻细胞时直接拿出来用就可以了。第二天转移至液氮,贵重的细胞尽快转移,不然会影响复苏成活率的。一般是用5次就更换一下异丙醇。现在也有一些商品化冻存液可以直接丢进-80的,很方便,效果也不错的。
  
  经验3:异丙醇的量是要保证的,不能低于表明的线,否则不能起到很好的程序性降温作用,我们是在4度放置,放了细胞后立马放到-80度冰箱,第二天再转移到液氮,效果很不错。异丙醇熔点:-87.9度的色透明具有乙醇气味的可燃性有毒液体。注意了有可燃性!急性毒性:口服-大鼠LD50:5840毫克/公斤;口服-小鼠LC50:3600毫克/公斤。刺激数据:眼睛-兔子100毫克/!请注意清理!
  
  经验4:应该不可以把冻存盒放4°的,因为梯度降温的起始点是室温20°左右,所以从-80℃拿出来的冻存盒应该现在室温静置一段时间待其恢复到室温再使用。而其中的异丙醇应使用6~7此后更换一次,而且保证液体量达到刻度线,否则降温效果会受到影响。
  
  经验5:冻存盒里的异丙醇一般是250ml,低于刻度了要加上,理论上是5次以后更换异丙醇,但是异丙醇对环境有害,我们可以多用几次,只是少了的时候要加满。还有冻存液里面的DMSO对细胞有毒性,尤其是室温的时候,所以冻存盒和冻存液先放4°,等把细胞用冻存液重悬好了放在冻存盒里,还放回4°,等到出细胞间的时候再拿到-80°里面保存。过夜再转入液氮。
  
  
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