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NEST细胞培养如何选择合适的呢?

点击次数:434 发布时间:2021-06-22
  NEST细胞培养是指在体外模拟体内环境(无菌、适宜温度、酸碱度和一定营养条件等),使之生存、生长、繁殖并维持主要结构和功能的一种方法。也叫细胞克隆技术,在生物学中的正规名词为细胞培养技术。
 
  不论对于整个生物工程技术,还是其中之一的生物克隆技术来说,本身就是细胞的大规模克隆。细胞培养技术可以由一个细胞经过大量培养成为简单的单细胞或极少分化的多细胞,而且细胞培养本身就是细胞的克隆。
 
  市场上的NEST细胞培养可不少,如何选择合适的呢?我们需要重点考虑孔的数量、孔的形状、微孔板颜色以及表面处理。
 
  1.孔的数量
 
  大多数用户在组织培养瓶上开始组织培养。不过,许多应用也需要多孔板。理想的数量嘛,取决于你所需的通量水平,以及是否有机器人的协助。完全手动地向96孔板中添加试剂,这并非不可行,但有电动移液器或机器人的帮助当然更好。扩展到384孔板,就更加需要机器人,而1536孔板更是绝对需要。当然,高密度多孔板的挑战还在于分析小型化。
 
  2.孔的形状
 
  孔的底部可以选择平的、圆的,或锥形的,这取决于细胞类型和下游应用。特别是需要对培养物进行成像或分光光度测定,通常平底(F-bottom)。对于不存在接触抑制的细胞,弧形底(C-bottom)也不错。圆底(U-bottom)适合悬浮培养,因为圆的表面让细胞难以附着和生长。而锥形底很少用于细胞培养实验,但在细胞沉淀时可能有用。
 
  3.微孔板的颜色
 
  多孔板的颜色也与应用息息相关。如果用相差显微镜或肉眼观察细胞,可选择透明的多孔板。不过,对于可见光光谱以外的应用(如冷光或荧光),有颜色的多孔板(如白色或黑色)则是必需的。在使用从顶部读数的仪器时,底部应该是不透明的,而使用显微镜或底部读数的仪器时,应选择底部透明的多孔板。冷光样品通常选择白色表面,以便最大限度提高信号的反射率,而大于300 nm的荧光应用通常使用黑色表面,以吸收激发信号。有颜色的表面还可以防止相邻孔之间的信号串扰。
 
  4.表面处理
 
  选择哪种细胞表面处理,这要取决于你培养的是悬浮细胞还是贴壁细胞。对于悬浮或球体细胞培养,它经过专门的疏水凝胶处理,可抑制细胞或蛋白附着。对于轻松附着的贴壁细胞(如HeLa),标准的组织培养表面就足够了。对于那些贴壁有困难的细胞(如原代细胞),或涉及到严格洗涤的应用,建议使用BRAND的cellGrade微孔板。这种独特的表面与多聚赖氨酸处理的表面相似,但它不是涂层,而是塑料性质的物理变化,因此不需要冷藏。对于那些敏感细胞或血清量减少的细胞,建议使用cellGrade plus表面。
 
  当然不能忽视培养容器的质量。这不仅仅指NEST细胞培养,还包括与细胞接触的一切,比如吸头,以避免细胞污染或死亡。
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